液相色谱—串联质谱法测定大白菜中15种农药残留
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摘要：采用液相色谱—串联质谱联用（LC-MS-MS）技术，建立大白菜中15种农药残留的测定方法。样品通过乙腈提取，经改良的QuEChERS方法净化后上机检测，结果表明：在0.05～0.20 mg/L范围内，15种目标物的线性系数>0.99，回收率为77.4%～95.2%，方法精密度为2.5%～9.6%。该方法简单、灵敏、迅速，可满足日常农产品农药监测检测工作的需要。
关键词：农药残留;大白菜;液相色谱—串联质谱;检测
中图分类号：S481.8 文献标识码：A 文章编号：1674-1161（2020）03-0030-04
大白菜是我国原产蔬菜，其营养丰富、味道鲜美，耐贮藏、易种植，在我国农产品市场中占有重要地位。在高温季节种植大白菜，容易引发病虫害，造成产量减少和品质下降，菜农往往通过施用大量农药和化肥来解决此问题，从而导致大白菜农药残留超标。大白菜在生长过程中至少要施用两种以上农药，一是打在根部避免地蛆啃食，二是打在叶子上防止病虫害，可见仅仅清洗大白菜的外表是不能够去除农药残留的。因此，建立一种分析大白菜中多种农药残留的方法十分重要。
目前农产品中多种农药残留检测方法主要有速测法、高效液相色谱法、气质联用法等。随着科技发展进步，液质联用技术逐渐被应用于蔬菜、花卉和茶叶的农药残留检测中，而被检测的农药种类也越来越多、越来越广泛。本课题将样品通过乙腈提取，经改良的QuEChERS方法净化，采用液相色谱—串联质谱方法，对大白菜中15种农药残留进行检测。
1 材料与方法
1.1 材料与试剂
1.1.1 农药标准物质 啶虫脒、涕灭威、阿维菌素、嘧菌酯、多菌灵、克百威、氯虫苯甲酰胺、灭幼脲、烯酰吗啉、甲氨基阿维菌素苯甲酸盐、吡虫啉、甲霜灵、辛硫磷、霜霉威、虫酰肼：农业农村部环境监测总站。
1.1.2 试剂 乙腈：色谱纯，美国天地公司;甲醇：色谱纯，美国天地公司;甲酸：色谱纯，霍尼韦尔（中国）有限公司;ProElut QuEChERS产品套装：规格为400 mg PSA/400 mg C18/1 200 mg MgSO4等，北京迪科马科技有限公司。
1.2 仪器与设备
K600型食物调理机：德国博朗公司;天平：精确度0.000 1 g，德国赛多利斯集团;AH-20型全自动均质器：睿科仪器（厦门）有限公司;TGL-20B型高速离心机：上海安亭科学仪器有限公司;LD4-8型离心机：北京京力离心机有限公司;Transferpette移液枪：1～10 mL，20～200 μL，100～1 000 μL，德国普兰德公司;Dispensette瓶口移液器：2.5～25.0 mL，德国普兰德公司;WH300型旋涡混合器：上海安亭科学仪器有限公司;Thermo TSQ Quantum Ultra液质联用仪：配电喷雾离子源（ESI），美国Thermo Fisher公司。
1.3 试验方法
1.3.1 样品采集 抽取当季不同地区的蔬菜大棚、批发市场和超市等处的大白菜，每个样品取3 kg，切块，搅匀，采用四分法取搅好的样品约200 g，放入聚乙烯瓶中，贴好标签，于-16～-20 ℃条件下冷冻保存。
1.3.2 QuEChERS前处理方法 1） 样品提取。取制备好的大白菜样品10.0 g于离心管中，加入20.0 mL乙腈，在全自动均质器上充分混匀1 min，取出后加入
1 200 mg MgSO4等盐类，在离心机上以5 000 r/min的转速离心2 min，取出后静置，以除去水分。2） 样品净化。吸取静置后的上清液10.0 mL，加入带有N-丙基乙二胺（PSA）和C18等吸附剂的小柱中，在离心机上以5 000 r/min的转速离心2 min，以除去杂质。取上清液250 μL，加入250 μL纯净水，装入上机小瓶，充分混匀后待测。
1.3.3 标准品的配制 采用加标回收试验方法。取各标准样品1 000 mg/L，用甲醇作溶剂，先配制成5 mg/L的混标储备液，再将混标储备液分别稀释成0.05，0.10，0.20 mg/L的标准工作溶液，装入上机小瓶，待测。
1.3.4 上机测定
1） 色譜条件。色谱柱：Hypersil GOLD-C18柱（100 mm×2.1 mm，3 μm）;柱温：30 ℃;进样量：10 μL;流动相：0.1%甲酸水溶液和甲醇溶液，梯度洗脱顺序见表1。
2） 质谱条件。电喷雾离子源，正离子扫描，多反应监测（MRM）。电喷雾电压：4 300 V，离子源温度：320 ℃;雾化器压力：35 psi;碰撞气流速：9 L/min;定性离子对、定量离子对和碰撞能量见表2，混合标准样品的总离子流色谱图如图1所示。
2 结果与分析
2.1 线性关系
以待测物浓度为横坐标（x），以峰面积为纵坐标（Y）绘制标准曲线，线性回归方程和相关系数（r2）见表3。
由表3可知：线性系数>0.99，试验结果符合GB/T 27417—2017《合格评定 化学分析方法确认和验证指南》的技术要求。
2.2 平均回收率与方法精密度
空白样品分别添加0.05，0.10，0.20 mg/L 3种不同浓度的农药，每组做2个添加平行，添加回收率换算成平均值，平均加标回收率和方法精密度检测结果见表4。
由表4可知：15种农药的3种添加水平回收率在77.4%～95.2%之间，方法精密度在2.5%～9.6%之间，试验结果符合GB/T 27404—2008《实验室质量控制规范 食品理化检测》的技术要求。0.05 mg/L浓度的回收率和精密度明显比0.10 mg/L与0.20 mg/L浓度的好，结果更接近100%。此方法比较可靠，前处理方法与仪器条件都比较成熟，不仅节省了样品和试剂的消耗，也大大缩短了前处理时间，结果也比较准确。 3 結论
采用先进的液相色谱—串联质谱技术，结合并改良目前普遍应用的QuEChERS前处理方法，测定大白菜中多种农药的残留。此方法省时省力、操作简便，而且重现性好、准确度高，不仅可以满足现代社会所需要的简便、灵敏、迅速、准确的多农药残留分析要求，而且可以利用最前沿的现代化检测手段，为农产品质量安全监测检测提供可靠的技术保障。
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Determination of 15 Pesticide Residues in Chinese Cabbage by
Liquid Chromatography-Tandem Mass Spectrometry
WANG Ti
（Liaoning Inspection， Examination & Certification Centre， Shenyang 110034， China）
Abstract： A method for the determination of 15 pesticide residues in Chinese cabbage was established by using liquid chromatography-tandem mass spectrometry （LC-MS-MS）.The samples were extracted by acetonitrile， purified by the improved QuEChERS method and then tested by the machine. The results showed that： Within the range of 0.05～0.20 mg/L， the linear coefficient of 15 target substances was > 0.99， the recovery rate was 77.4%～95.2%， and the precision of the method was 2.5%～9.6%. The method is simple， sensitive and rapid， which can meet the needs of daily agricultural pesticide monitoring and testing.
Key words： pesticide residue; Chinese cabbage; liquid chromatography-tandem mass spectrometry; detection
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