复方中药组分对链脲菌素糖尿病大鼠糖耐量的影响
来源:用户上传
作者:
[摘要]目的 觀察复方中药组分对糖尿病的防治作用，并探讨其防治机制。方法 腹腔注射链脲佐菌素（给药剂量为55 mg/kg体重）诱导大鼠糖尿病模型，造模成功后将其随机分为空白对照组、模型对照组、药物干预组（中药组分干预小剂量组、中药组分干预大剂量组），共40只，每组10只。药物干预组分别用大剂量和小剂量复方中药组分进行药物干预，空白对照组和模型对照组每天按10 ml/kg体重标准以生理盐水灌胃，观察空腹血糖、糖耐量及胰腺的超氧化物歧化酶（SOD）活力水平和丙二醛（MDA）含量。结果 模型对照组的血糖水平显著高于空白对照组，差异有统计学意义（P<0.001）；药物干预组0.0、0.5、1.0、2.0 h的血糖水平明显低于模型对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。模型对照组的糖耐量水平明显低于空白对照组，复方中药组分干预大剂量组一定时间内的糖耐量水平明显高于模型对照组。模型对照组的SOD水平明显低于空白对照组，MDA水平明显高于空白对照组；中药组分干预大剂量组的SOD水平明显高于模型对照组，MDA水平明显低于模型对照组，差异均有统计学意义（P<0.01）。中药组分干预小剂量组的SOD水平高于模型对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。中药组分干预小剂量组的MDA水平明显低于模型对照组，差异有统计学意义（P<0.01）。结论 复方中药组分对糖尿病有防治作用。
[关键词]复方中药组分；抗氧化；糖耐量
[中图分类号] R587.1 [文献标识码] A [文章编号] 1674-4721（2019）4（c）-0045-03
Influence of compound Chinese medicine components on glucose tolerance in streptozotocin-induced diabetic rats
YANG Xin HUANG Bo LIU Yong-lin FENG Yao LIU Ming-hui ZHANG He SONG Guang-yi LIU Wen-yan▲
Liaoning Institute of Basic Medicine， Liaoning Province， Shenyang 110101， China
[Abstract] Objective To observe the preventive and therapeutic effects of compound Chinese medicine components on diabetes mellitus （DM）， and to explore its prevention and treatment mechanism. Methods The rat model of DM was induced by intraperitoneal injection of streptozotocin administered at a dose of 55 mg/kg. After a successful modeling， a total of 40 rats were randomly assigned into the blank control group， the model control group and the drug intervention group （the high-dose drug intervention group， the low-dose drug intervention group）， 10 cases in each group. The drug intervention group was treated with high- and low-dose of compound Chinese medicine components， the blank control group and the model control group were intragastrically administered with normal saline per day according to the weight standard of 10 ml/kg. The levels of fasting blood glucose （FBG）， glucose tolerance， superoxide dismutase （SOD） activity and malondialdehyde （MDA） in pancreas were observed. Results The level of blood glucose of the model control group was significantly higher than that of the blank control group （P<0.001）. The levels of blood glucose at 0.0， 0.5， 1.0， 2.0 h of the drug intervention group were significantly lower than those of the model control group （P<0.05）. The levels of glucose tolerance of the model control group were significantly lower than those of the blank control group， the levels of glucose tolerance for some time of the compound Chinese medicine component intervention group in a large dose administration were significantly higher than those of the model control group. The level of SOD of the model control group was significantly lower than that of the blank control group， and the MDA of the model control group was higher than that of the blank control group， the level of SOD of the high-dose intervention group was significantly higher than that of the model control group， the level of MDA of the high-dose drug intervention group was greatly lower than that of the model control group （P<0.01）. The level of SOD of the low-dose drug intervention group was higher than that of the model control group， with statistical difference （P<0.05）. The MDA in the low-dose drug intervention group was much lower than that in the model control group， with statistical significance （P<0.01）. Conclusion Compound Chinese herbal medicines have preventive and therapeutic effects on diabetes mellitus. [Key words] Compound Chinese medicine components； Antioxidant； Glucose tolerance
糖尿病是与多因素相关的慢性全身性疾病，中药及其有效组分在糖尿病及其并发症的防治过程中有独特的优势。目前已经确认有60多种中药对糖尿病具有防治作用，这些药物或具有清热解毒功效、或具有益气养阴功效、或具有活血化瘀功效，其有效成分主要为多糖、苷类、酮类和生物碱等[1-2]。本实验对链尿菌素糖尿病大鼠进行复方中药组分药物干预，旨在验证其对糖尿病的治疗效果，进而探讨其治疗机制。
1材料与方法
1.1材料与动物
选取40只SD大鼠，SPF级，8周龄，雌雄各半，体重为（200±10）g[许可证号：SCXK（辽）2010-0001，辽宁长生生物]。药物及试剂：链脲佐菌素（Streptozotocin，STZ）是Adamas Reagent CO.Ltd产品（货号：CFHF-33231A，批号：644548120509，规格：25 g，95+）；三七皂苷、麦冬、黄芪等中药多糖组分购自北京普惠天悦公司；超氧化物歧化酶（SOD）（WST-1法）和丙二醛（MDA）（TBA法）测定试剂盒购自南京建成生物工程研究所。仪器：SXT-1型血糖仪（长沙三诺）及血糖试纸（批号：1109NW）；低速离心机（型号LDZ5-2，北京京立）；酶标仪（型号318C，上海三科）；紫外-可见分光光度计（型号SPECORD plus200，德国耶拿）[1-3]。
1.2方法
1.2.1诱导大鼠糖尿病模型 大鼠适应性饲养1周，禁食12 h按55 mg/kg体重一次性腹腔注射链脲佐菌素的枸橼酸缓冲液（临用前配置，STZ的浓度12.2 mg/ml，枸橼酸缓冲液浓度为0.01 mol/L，pH值为5.0），1周后取尾尖静脉血检测血糖，血糖水平超过16.0 mmol/L者为造模成功，分笼备用。
1.2.2分组 给药正常大鼠10只（雌雄各半），按55 mg/kg体重标准一次性腹腔注射枸橼酸缓冲液作为空白对照组。将糖尿病鼠随机分为模型对照组、中药组分干预大剂量组、中药组分干预小剂量组（10只/组、雌雄各半）。空白对照组和模型对照组每天按10 ml/kg体重标准以生理盐水灌胃；中药干预组的大、小剂量组每天分别按复方中药组分500 mg/kg体重、50 mg/kg体重标准灌胃。
1.2.3指标检测 连续药物干预10周后空腹12 h，取尾静脉血检测血糖，再以25%葡萄糖（5 g/kg）灌胃，检测其0.5、1.0、2.0、3.0 h的血糖，做糖耐量实验。继续药物干预2周后处死各组大鼠，取胰腺制备10%组织液（3000 r/min低温离心15 min），检测SOD、MDA。指标检测按照试剂盒说明书进行操作[4-8]。
1.3统计分析
采用SPSS 12.0统计学软件进行数据分析，计量资料以均数±标准差（x±s）表示，采用t检验，计数资料以率（%）表示，采用χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。
2结果
2.1各组不同时间段血糖水平的比较
模型对照组0.0、0.5、1.0、2.0、3.0 h的血糖水平显著高于空白对照组，差异有统计学意义（P<0.001）；药物干预组（复方中药组分干预大剂量组、复方中药组分干预小剂量组）0.0、0.5、1.0、2.0 h的血糖水平明显低于模型对照组，差异有统计学意义（P<0.05）（表1）。提示，模型对照组的糖耐量明显低于空白对照组，复方中药组分干预大剂量组一定时间内的糖耐量明显高于模型对照组。
2.2各组胰腺SOD和MDA水平的比较
模型对照组的SOD水平明显低于空白对照组，MDA水平明显高于空白对照组，差异有统计学意义（P<0.01或P<0.05）。中药组分干预大剂量组的SOD水平明显高于模型对照组，MDA水平明显低于模型对照组，差异有统计学意义（P<0.01）。中药组分干预小剂量组的SOD水平高于模型对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。中药组分干预小剂量组的MDA水平明显低于模型对照组，差异有统计学意义（P<0.01）（表2）。
2.3各组形态学改变
光镜显示，相较于空白对照组，模型对照组的胰岛有明显萎缩和消失；胰岛细胞广泛存在空泡变性，局部有玻璃样变性，周围有炎性细胞浸润，中药干预组上述病理改变明顯改善并恢复（图1～4）。
3讨论
糖尿病作为动脉粥样硬化和高血压等心血管疾病的独立危险因素，严重影响着人类的健康和生活质量。近年来，随着糖尿病发病率和死亡率的提升，寻找有效的治疗药物成为糖尿病防治的关键。本实验采用一次性腹腔注射链脲佐菌素的方法破坏胰岛建立大鼠糖尿病模型，病理切片显示模型组相较于空白组胰岛明显变小，胰岛细胞发生玻璃样变性并伴有炎症反应，胰岛有明显破坏。注射后链脲佐菌素1周和10周的模型对照组的血糖水平显著高于空白对照组，药物干预组的血糖水平明显低于模型对照组，提示三七皂苷、麦冬、黄芪等中药多糖组分具有明显的降糖作用；药物干预组病理切片显示胰岛B细胞的病理变化有明显改善，推测药物干预组的降糖作用与改善胰岛B细胞分泌功能密切相关。口服葡萄糖耐量试验（OGTT）是测量机体对葡萄糖的耐受能力，通过一定时间内血糖浓度的变化，推测胰岛素的分泌情况及对血糖的调节能力，是糖尿病的确诊试验。OGTT常作为判定某种药物降糖效果的一种评价指标。有研究显示血清超敏C-反应蛋白（hs-CRP）、同型半胱氨酸（Hcy）、光抑素C（CysC）水平在糖代谢异常早期就已经升高，并参与了糖尿病动脉硬化的进程[9-13]。糖耐量下降会增加心脑血管系统疾病的发病率，本实验显示药物干预组（大剂量组和小剂量组）的糖耐量明显纠正，这与病理显示的胰岛B细胞的病理变化明显改善结果相一致。SOD具有超氧阴离子自由基的清除能力，其活性代表着机体抗氧化能力（氧自由基的清除能力）；MDA是衡量组织过氧化损伤程度的指标。 综上所述，本实验对胰腺SOD水平和MDA水平的检测结果显示复方中药组分对胰腺组织的过氧化物损伤有所纠正，进而改善机体对血糖的调节能力，其在预防和降低糖尿病心脑血管并发症方面具有积极作用[10-16]。
[参考文献]
[1]雷定超，张兰兰，周水平，等.中药治疗糖尿病现状与研究进展[J].中国医药导报，2012，9（21）：8-9，12.
[2]宋光熠，姜雅秋，李屹，等.二多糖膠囊对实验性糖尿病大鼠血糖的影响[J].吉林医学，2007，28（15）：1685-1686.
[3]Clarke WL，Cox D，Gonder-Frederick LA，et al.Evaluating clinicalaccuracy of systems for self-monitoring of blood glucose[J].Diabetes Care，1987，10（5）：622-628.
[4]Weinstein RL，Schwartz SL，Brazg RL，et al.Accuracy of the 5-day Free Style Navigator continuous glucose monitoring system comparison with frequent laboratory reference measurements[J].Diabetes Care，2007，30（5）：1125-1130.
[5]张娴，刘莉.白藜芦醇粉对2型糖尿病患者血糖及超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、丙二醛（MDA）的影响[J].河北中医，2017，39（1）：19-22.
[6]李屹，张建军.海鞘对实验性糖尿病大鼠非酶糖基化的影响[J].辽宁医学院学报，2008，29（2）：125-127.
[7]刘文艳，刘晓苏.复方中药组分抗糖尿病大鼠糖过氧化作用[J].中国老年学杂志，2013，33（20）：5026-5027.
[8]车光升，宋光熠.海鞘对糖尿病大鼠血浆内皮素-1影响[J].中国公共卫生，2009，25（5）：571-572.
[9]梁峰，胡大一，沈珠军.2014 美国糖尿病指南：糖尿病诊疗标准[J].中华临床医师杂志（电子版），2014，8（6）：151-159.
[10]安梅，周瑾，陈晓宇.白藜芦醇药理学作用的研究进展[J].肿瘤药学，2014，4（4）：242-246.
[11]谷雨明，黄延芹，徐云生.现代中医治疗糖尿病的辨证体系研究进展[J].河北中医，2015，37（10）：1587-1589.
[12]陆菊明.预混胰岛素在糖尿病治疗中的应用—2010年《中国2型糖尿病防治指南》解读[J].中华糖尿病杂志，2011，3（2）：187-189.
[13]金萍，陈涛，石秀娥，等.外周血指标检测在动脉粥样硬化性脑梗死中的应用研究[J].国际检验医学杂志，2017， 38（11）：143-145.
[14]王敏.糖耐量减低与动脉粥样硬化相关性的研究进展[J].医学诊断，2015，5（1）：1-5.
[15]陈涛，石秀娥，王一萍，等.糖耐量异常人群血清hs-CRP、Hcy、CysC水平与颈动脉粥样硬化的相关性研究[J].国际检验医学杂志，2018，39（15）：1838-1841.
[16]刘晶晶，林桂明，王丽颖，等.PDTC通过抑制NF-κB及Wnt/β-catenin信号通路修复1型糖尿病大鼠主动脉病变[J].中国药理学通报，2018，34（11）：1622-1627.
（收稿日期：2018-11-26 本文编辑：祁海文）
转载注明来源:https://www.xzbu.com/6/view-14710401.htm
