URAT1基因多态性与维吾尔族高尿酸血症的交互作用研究

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　　[摘要] 目的 探索人尿酸盐转运子基因（URAT1）rs3825018、rs505802和rs524023位点基因多态性与维吾尔族高尿酸血症（HUA）的交互作用。 方法 選取2014年11月～2016年12月在新疆乌鲁木齐市某附属医院健康管理中心参加健康体检的维吾尔族2340例作为研究对象，并根据尿酸水平分为HUA组（n = 986）与对照组（n = 1354）。测量研究对象的身高、体重、腰臀围、血压等一般指标，并收集其禁食12 h后的静脉血液标本，检测血尿酸、肌酐、葡萄糖、总胆固醇和三酰甘油等生化指标及URAT1基因rs3825018、rs505802和rs524023位点基因多态性。 结果 HUA组与对照组的URAT1基因rs3825018、rs505802和rs524023位点等位基因及基因型频率分布比较，差异均无统计学意义（P > 0.05）。遗传模型分析发现，无论是否调整年龄和性别，rs3825018、rs505802和rs524023三个多态性位点在三个遗传模型中均与维吾尔族HUA无显著相关（95%CI跨越1）。交互作用结果显示，维吾尔族女性携带rs505802位点突变在相加模型中存在负交互作用（S = -0.146，P < 0.05）。 结论 URAT1基因rs3825018、rs505802和rs524023位点突变可能不会影响维吾尔族HUA的易感性，维吾尔族女性携带rs505802位点突变可能会在一定程度上降低发生HUA的风险。
　　[关键词] 人尿酸盐转运子1基因;单核苷酸基因多态性;维吾尔族;高尿酸血症
　　[中图分类号] R589.7          [文献标识码] A          [文章编号] 1673-7210（2019）03（a）-0004-04
　　[Abstract] Objective To explore the interaction between human urate transporter 1 （URAT1） gene rs3825018， rs505802 and rs524023 gene polymorphisms and Uygur hyperuricemia （HUA）. Methods A total of 2340 Uygur subjects who took part in physical examination in the health management center of an Affiliated Hospital in Urumqi from November 2014 to December 2016 were selected as subjects and divided into HUA group （n = 986） and control group （n = 1354） according to the level of uric acid. The body height， weight， waist and hip circumference， blood pressure and other general indicators were measured. The venous blood samples were collected after fasting for 12 hours. The biochemical indicators such as serum uric acid， creatinine， glucose， total cholesterol and triacylglycerol， and the polymorphisms of URAT1 gene rs3825018， rs505802 and rs524023 loci were detected. Results The distribution of alleles and genotype frequencies of rs3825018， rs505802 and rs524023 in URAT1 gene were not significantly different between HUA group and control group （P > 0.05）. Genetic model analysis found that rs3825018， rs505802 and rs524023 were not significantly associated with Uyghur HUA in all three genetic models （95% CI across 1）， regardless of age or gender. The results of the interaction showed that there was a negative interaction between the Uygur females carrying the rs505802 locus mutation in the additive model （S = -0.146， P < 0.05）.  Conclusion The mutations of rs3825018， rs505802 and rs524023 in URAT1 gene may not affect the susceptibility of Uygur HUA. The risk of HUA may be reduced to some extent by carrying rs505802 mutation in Uygur women. 　　[Key words] Human urate transporter 1 gene; Single nucleotide polymorphism; Uyghur; Hyperuricemia
　　任何原因引起体内尿酸水平增高超过一定界限时即被定义为高尿酸血症（HUA）[1]。其中，尿酸排泄障碍被认为是引起HUA的主要原因，而肾脏在尿酸排泄过程中起着至关重要的作用[2]。人尿酸盐转运子1（URAT1）基因由SLC22A12基因编码，在肾脏近曲小管表达，在肾脏对尿酸的重吸收过程中发挥作用[3-4]。本研究拟探讨URAT1基因3个位点多态性对HUA易感性的影响及其与一般生化指标间的交互作用，以期为维吾尔族HUA的防治提供新思路。
　　1 资料与方法
　　1.1 一般资料
　　选取2014年11月～2016年12月在新疆乌鲁木齐市某附属医院健康管理中心参加健康体检的维吾尔族2340例作为研究对象。纳入标准：①年龄20～70岁;②三代直系亲属均为维吾尔族。排除标准：①有恶性肿瘤、血液疾病、感染及自身免疫性疾病等;②近期服用降尿酸药物。将尿酸水平男性> 417 μmol/L（7 mg/dL），女性>357 μmol/L（6 mg/dL）的研究对象纳入HUA组，反之纳入对照组[5]。患者均知情同意并签署知情同意书，本研究经医学伦理委员会审批同意。
　　1.2 研究方法
　　1.2.1 资料收集  记录研究对象的一般信息及病史，并测量一般身体指标（身高、体重、腰臀围、血压）。抽取其禁食12 h后的外周静脉血5 mL，充分抗凝后等量分装成2份。取出其中一份，采用低速离心机，3500 r/h常温离心3 min，分离血清，用日立7600全自动生化分析仪测定血清尿酸（SUA）、肌酐（Cr）、葡萄糖、总胆固醇（TC）和三酰甘油（TG）等生化指标;另一份冻存于-20℃冰箱，备用。定义①肥胖：体重指数（BMI）≥28 kg/m2，②高血压：血压≥140/90 mmHg（1 mmHg=0.133 kPa），③高血糖：空腹血糖（GLU）≥6.1 mmol/L或已确诊为糖尿病的患者，④高胆固醇血症：总胆固醇≥5.18 mmol/L，⑤高甘油三酯血症：三酰甘油≥1.70 mmol/L，⑥慢性肾脏病：肾小球滤过率（eGFR）<60 mL/（min·1.73m2）。
　　1.2.2 基因多态性检测  采用全自动核酸提取仪，并按操作说明（磁珠法）提取全血DNA;采用琼脂糖凝胶电泳法检测所提取获得地DNA的纯度及浓度。查阅NCBI数据库并结合Premier Primer 5.0软件设计相应的引物（rs3825018：F（正向引物）：AAATTCAGCTTTCC-
　　CGGGAGGT，R（反向引物）：TACTCAAGGGGCCCA-
　　GAAGAGG;rs505802：F（正向引物）：GCCTAAGGGT-
　　GAGCCTGGAGAC，R（反向引物）：GGGCTCTGCACCT-TGAGTCATC;rs524023：F（正向引物）：GGGCTCTGC-AGGAGGCATAGAT，R（反向引物）：CTCTGTGTGGGC-TTGGGTCACT），使用多重基因点突变快速检测技术对筛选出的URAT1基因三个SNP位点进行分型检测。
　　1.3 统计学方法
　　采用SPSS 20.0统计学软件进行数据分析，符合正态分布计量资料采用均数±标准差（x±s）表示，两组间比较采用t检验;不符合正态分布的改用中位数（M）或四分位数间距（P25，P75）表示，两组间比较采用非参数检验（秩和检验）。计数资料用率表示，组间比较采用χ2检验，以P < 0.05为差异有统计学意义。
　　2 结果
　　2.1 临床指标比较
　　本研究共纳入2340名维吾尔族作为研究对象，其中986例HUA患者为HUA组（男589例，女397例）和同期健康体检者1354例为对照组（男794例，女560例）。两组性别分布差异无统计学意义（χ2 = 0.28，P > 0.05）。两组年龄、BMI、收缩压（SBP）、舒张压（DBP）、SUA、GLU、血尿素氮（BUN）、Cr、eGFR、TG和TC临床测量指标比较，差异有高度统计学意义（P < 0.01）。
　　2.2 等位基因与基因型频率分布
　　对照组URAT1基因rs3825018、rs505802和rs52-4023位点基因型频率符合HWE平衡检验（χ2 = 0.08，P = 0.96;χ2 = 1.00，P = 0.61;χ2 = 0.57，P = 0.75）。统计分析发现，两组间rs3825018、rs505802和rs524023位点等位基因及基因型频率分布比较，差异均无统计学意义（P > 0.05）。见表1。
　　2.3 遗传模型中URAT1基因突变与HUA的关联分析
　　无论是否调整年龄和性别，rs3825018、rs505802和rs524023三个多态性位点在三个遗传模型（加性模型、显性模型和隐性模型）中均与维吾尔族HUA无显著相关性（95%CI跨越1）。
　　2.4 URAT1基因多态性与HUA的交互作用分析
　　选择是否为HUA患者为因变量，进行多因素Logistic回归。分析发现，年龄（OR = 1.01，95%CI：1.00～1.02）、高血压（OR = 1.42，95%CI：1.15～1.76）、高甘油三酯血症（OR = 1.27，95%CI：1.07～1.50）和高胆固醇血症（OR = 1.24，95%CI：1.03～1.50）為维吾尔族HUA的危险因素。选取以上变量分别与URAT1基因三个位点进行交互作用分析，结果表明，维吾尔族女性携带rs505802位点突变在相加模型中存在负交互作用（S = -0.146，P < 0.05），会在一定程度上降低发生HUA的风险。 　　3 讨论
　　近年来，随着经济的飞速发展，人们生活方式发生改变，HUA的患病率呈逐年上升趋势，流行病学调查资料显示，我国HUA的患病率在8.4%～25.0%[6-7]。本课题组[8-9]前期调查新疆维吾尔族HUA的患病率时发现，新疆维吾尔族HUA的患病率约为8%。众多研究[10-15]表明，无症状HUA和肥胖、高血压、糖尿病、冠状动脉粥样硬化等代谢性疾病及心脑血管疾病间互为因果，且是痛风发生发展的前提条件。本研究结果显示，HUA组BMI、SBP、DBP、SUA、GLU、BUN、Cr、eGFR、TG和TC等一般生化指标的水平显著高于对照组，差异有高度统计学意义（P < 0.01），与大多数研究[8-9]结果相同。
　　尿酸在体内的代谢要依次经历肾脏对其的滤过及重吸收。有研究表明，URAT1基因在肾脏调控尿酸的重吸收过程中发挥作用，其被誉为高特异性、电中性的尿酸盐及阴离子交换器[16]。URAT1基因位于染色体11q13，含有10个外显子、9个内含子及12个跨膜结构域，全长2642 bp，编码区总长1659 bp，可编码555个氨基酸的蛋白质，是一种膜转运蛋白。其包含2种剪切体-剪切体a（含有553个氨基酸）和剪切体b（含有332个氨基酸），相对于a而言，剪切体b缺失了221个氨基酸，推测这种特殊结构可能影响肾小管对尿酸的重吸收[17]。已有研究表明[18]，URAT1基因rs7929627、rs75786299、rs3825017、rs11602903和rs121907892位点多态性与机体内的尿酸水平密切相关。
　　本研究结果提示，URAT1基因三个所选位点等位基因及基因型频率在两组间分布差异均无统计学意义（P > 0.05），同时，在三个遗传模型中也均与维吾尔族HUA无显著相关性（95%CI跨越1），与韩琳等[19]2012年的研究结果相悖。究其原因，可能與本研究所选URAT1基因三个位点均存在于内含子区，突变不能有效导致功能改变相关。但本研究经交互作用分析发现，维吾尔族女性携带rs505802位点突变在相加模型中存在负交互作用（S = -0.146，P < 0.05），提示URAT1基因rs505802位点突变可能会在一定程度上降低维吾尔族女性发生HUA的风险。本研究所选URAT1基因三个多态性位点目前的研究尚少，因此，此结论还需进一步验证。
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　　（收稿日期：2018-05-22  本文编辑：王   蕾）
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