一例禽白血病的临床诊断

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　　摘要：以河南省平顶山市鲁山县马楼乡一养鸡场为例，介绍了其发病情况、临床症状、病理变化及实验室检测过程，最终确诊为禽白血病病毒（A/B亚群）。
　　关键词：禽白血病;诊断;血清学检测
　　中图分类号：S858.31        文献标识码：B        文章编号：1007-273X（2019）07-0030-01
　　禽白血病又称禽白细胞增生病，是由禽白血病病毒和禽肉瘤病病毒群中的病毒引起的禽类多种肿瘤性疾病的总称，该病毒的主要宿主是鸡，以垂直传播为主，对鸡群在增重和产蛋方面有严重影响，尤其是患病鸡抵抗力下降，容易感染多种疾病，给鸡群的饲养管理带来极大困扰。
　　1  发病情况
　　2019年5月6日，平顶山市鲁山县马楼乡一3 000羽鸡场出现零星死亡。鲁山县畜牧局立即组织人员进行抽样，采集血清和咽喉、泄殖腔拭子各30份，迅速送往平顶山市疫控中心实验室进行检测，并对该鸡场周围邻近鸡场进行流行病学调查，未发现发病情况。
　　2  临床症状及病理变化
　　现场勘查发现零星鸡只出现精神不振、食欲下降、消瘦，背毛紊乱无光泽、鸡冠发白、发皱、萎缩、个别出现黄绿色粪便。通过解剖5只病死鸡发现其肝脏明显肿大，且颜色呈灰白色，表面有肿瘤病灶;脾脏体积增大，有肿瘤结节;法氏囊肿大，剖面有结节增生，瘤体剖面呈豆腐渣样，肌肉贫血等病理症状，根据临床症状及剖检的病理变化初步诊断为肿瘤性动物疫病。
　　3  实验室检测
　　3.1  血清学检测
　　使用IDEXX禽白血病病毒抗体检测试剂盒（ALV Ab）检测鸡血清中禽白血病病毒（A/B亚群）抗体。该试剂盒用于测定鸡血清中禽白血病病毒（A/B亚群）抗体的相对水平，内源性的 E亚群禽白血病病毒抗体不会被检测。将待检血清样品加入包被有病毒抗原的96孔酶联免疫反应板上，禽白血病病毒A/B亚群的抗体与病毒抗原形成抗原抗体复合物。洗掉未反应物质后加入酶标二抗（HRPO），将没有结合的HRPO洗掉，并加入底物，最后加入终止液并于650 nm测量吸光度。显色强度与被检样品中禽白血病病毒抗体（A/B亚群）的含量呈直接相关。
　　使用IDEXX禽白血病病毒J亚群抗体检测试剂盒（ALV-J）检测鸡血清中禽白血病病毒J亞群抗体。将样品加入包被有禽白血病病毒J亚群（ALV-J gp85）抗原的96 孔酶联免疫反应板上，针对禽白血病病毒J亚群（ALV-J gp85）的抗体会与病毒抗原结合形成抗原抗体复合物。洗掉未结合的物质后加入HRPO，将没有结合的HRPO洗掉，并加入底物，最后加入终止液并于650 nm处测量吸光度，显色强度与被检样品中禽白血病病毒J亚群抗体的含量呈直接相关。
　　3.2  病原学检测
　　使用美国辉瑞试剂盒进行病原学检测，试验设计用包被的抗P-27抗体结合并检测ALV的P-27抗原含量，试验原理是将抗P-27抗体包被微孔，再加入受ALV感染鸡的血清或蛋清样品，样品中含有特异的ALV抗原和P-27抗原，抗P-27抗体和P-27抗原发生反应，形成抗原抗体复合物，洗涤液洗去多余的未反应物，加入过氧化物标记的兔抗P-27抗体，洗涤后再加入二铵盐ABTS底物显色，加入终止液，用酶标仪在405～410 nm测吸光度。
　　4  诊断结果
　　4.1  血清学检测结果
　　A/B亚群抗体共检测30份血清样品，其中30份抗体阳性，阳性率100%，且抗体OD值与临界值相差甚大，说明血清中禽白血病病毒抗体（A/B亚群）含量较高。J亚群抗体检测共检测30份血清样品，其中0份抗体阳性，阳性率为0。
　　4.2  病原学检测结果
　　试验共检测30份血清样品，30份均为禽白血病P-27抗原阳性，且OD值与临界值相差甚大，说明样品中P-27抗原含量高。
　　依据实验室检测数据，确诊该鸡群感染了禽白血病病毒（A/B亚群）。
　　5  讨论
　　目前对禽白血病尚无有效的治疗方法，疫苗接种效果亦不佳。因为禽白血病的传播主要是经垂直传播，水平传播仅占次要地位，所以国内外控制禽白血病主要采用净化种群的方式来进行。养殖场按照“检测-淘汰/隔离-检测-淘汰/隔离-检测-淘汰/隔离”的程序，采取淘汰禽白血病检测阳性鸡和可疑鸡、隔离同群阴性鸡，同时加强消毒和提高饲养管理水平等综合措施，以培育出无禽白血病/肉瘤病毒的健康鸡群，也可通过选育对禽白血病有抵抗力的鸡种，减少禽白血病的传播。对于某些污染严重的原种禽场，应及时更换品系，加强日常管理，做好各项消毒，以减少该病的传播，降低养殖风险及损失。
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