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围产期孕妇B族链球菌感染的筛查方法对结果的影响

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  摘要:目的  通过比较聚合酶链反应(PCR)、显色平板法两种筛查方法,探讨围产期孕妇B族链球菌(GBS)感染的合适快速检测方法。方法  选取2016年5月~2018年5月我院152例常规产检的围产期孕妇,采集孕妇阴道分泌物后分别做PCR检测与显色平板法,并对结果进行质谱检测确认。比较两种方法对GBS的阳性检出率。结果  PCR检测方法的阳性检出率为 6.58%(10/152),灵敏度为77.27%(17/22),显色平板法的阳性检出率11.18%(17/152),灵敏度为50.00%(10/22)。结论  两种筛查方法均能检测GBS,应用显色平板法对筛查围产期孕妇的GBS感染灵敏度更高。临床中对围产期孕妇的GBS 筛查采用显色平板培养的方法能提高GBS的检出率。
  关键词:围产期孕妇;B族链球菌;GBS检查;显色平板
  中图分类号:R714.7                                 文献标识码:A                                 DOI:10.3969/j.issn.1006-1959.2019.10.057
  文章编号:1006-1959(2019)10-0171-02
  Abstract:Objective  A suitable rapid detection method for infection of group B streptococcus (GBS) in perinatal women was conducted by comparing two methods of polymerase chain reaction (PCR) and chromogenic plate method. Methods  From May 2016 to May 2018, 152 cases of perinatal pregnant women in our hospital were selected. The vaginal secretions of pregnant women were collected and PCR detection and chromogenic plate method were performed respectively. The results were confirmed by mass spectrometry. The positive detection rate of GBS was compared between the two methods. Results  The positive detection rate of PCR detection method was 6.58% (10/152), the sensitivity was 77.27% (17/22), the positive detection rate of chromogenic plate method was 11.18% (17/152), and the sensitivity was 50.00%(10/22). Conclusion  Both screening methods can detect GBS, and the chromogenic plate method is more sensitive to screening GBS infection in perinatal women. In clinical practice, GBS screening for perinatal pregnant women can improve the detection rate of GBS by using chromogenic plate culture.
  Key words:Perinatal pregnant women;Group B streptococcus;GBS examination;Chromogenic plate
  B族鏈球菌(group B streptococcus,GBS)亦称无乳链球菌,为革兰阳性菌,属于条件致病菌,是一种可定植于孕产妇肠道和阴道的兼性厌氧菌。孕妇GBS感染可引起胎膜早破、流产以及绒毛膜羊膜炎等,也是新生儿早发型GBS感染的主要危险因素,据文献报道,有40%~70%的携带GBS围产期孕妇在生产过程感染新生儿,引起新生儿败血症、肺炎等严重疾病[1]。GBS首次被发现会导致围产期孕妇死亡是在1938年,正常情况下非妊娠女性的阴道和肛门也有GBS定植的现象,但是致病风险很小,然而对于围产期的孕妇来说,由于体内激素水平、特殊的生理生化指标的改变,GBS的致病率远远高于非妊娠女性,此外,GBS也会以垂直传播的方式使新生儿感染。由此可见,GBS的危害不容小觑[2]。本研究对我院152例常规产检的围产期孕妇采集孕妇阴道分泌物后分别做PCR检测与显色平板法,以期为围产期孕妇人群做好GBS感染的筛查提供依据。
  1资料与方法
  1.1一般资料  选取2016年5月~2018年5月来天津市和平区妇产科医院进行常规产检的152例围产期孕妇。纳入对本次研究内容全部知晓且自愿参与者,无流产病例,排除有夫妻生活者以及使用抗生素者。本次研究经过医院伦理委员会同意。孕妇孕周35~37周,平均孕周(36.23±0.68)周,年龄22~41岁,平均年龄(26.22±4.23)岁。首次妊娠者122例,有分娩史者30例,所有孕妇均接受GBS感染筛查。   1.2试剂  PCR仪:7500型,美国ABI;试剂:博尔诚(北京)科技有限公司;显色平板:上海一研生物科技有限公司。质谱检测:由于本院没有质朴监测的相关机器和技术,因此将质谱检测的项目送第三方实验室完成。
  1.3方法
  1.3.1标本采集  在充分告知孕妇本次研究的全部内容并取得孕妇同意后,由产科医师仔细将拭子插入孕妇的阴道内,并旋转拭子采集阴道1/3处分泌物,标本采集完成后放置在无菌试管中,将标本送至我院检验科进行PCR检测以及显色平板法筛查GBS感染情况。
  1.3.2检验方法  本次研究涉及到的检验方法全部按照《全国临床检验操作规程》中的临床微生物学检验常规方法进行。PCR法检测以及显色平板法的检测严格按照厂家关于产品说明书的操作步骤进行,检验科的检验人员记录全部实验过程、所用到的仪器、试剂、过程、结果。
  1.4统计学方法  本研究数据应用SPSS 19.0统计学软件处理,计量资料以(x±s)表示,采用t检验,计数资料以(%)表示,采用?字2检验。P<0.05为差异有统计学意义。
  2结果
  2.1检测结果  在152例围产期孕妇样本中,经显色平板法检测GBS感染为17例,PCR法检测GBS感染为10例,经第三方实验室的质谱检测结果确认后,本次152例樣本中,最终确认GBS阳性22例,阳性率14.47%。PCR检测方法的阳性检出率为6.58%(10/152),显色平板法的阳性检出率11.18%(17/152),见表1、表2。PCR检测方法与显色平板法的GBS检测阳性率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。
  2.2灵敏度结果  PCR检测法的灵敏度为77.27%(17/22),显色平板法的灵敏度为50.00%(10/22),显色平板法的灵敏度高于PCR检测法,差异具有统计学意义(?字2=4.697,P=0.030)。
  3讨论
  GBS属于条件致病菌,常寄生于下消化道及泌尿生殖道。有文献报道,由于地区和种族的差异性,围产期孕妇GBS带菌率在6.5%~36.0%波动,我国则为10.1%~32.4%[3]。在GBS的标本选取方面,国内报道文献多取自阴道后穹隆分泌物,由于被检查GBS的围产期孕妇的孕周不同、检测方法也存在差异性,故而本研究对PCR检测和显色平板法进行了对比,本次两种检测方法检出GBS阳性率分别为6.58%和11.18%,可以看出是低于上述关于我国围产期孕妇GBS带菌率的范围的,这可能与样本量不够大以及标本损失有关系。
  GBS是围产期孕妇群体最常见的感染致病菌,被感染后可以很轻松穿过绒毛膜,若孕妇在GBS筛查中检出GBS阳性,在威胁自身的生命的同时,对新生儿也存在极大的生命威胁。曾有文献报道对死亡新生儿肺部组织进行GBS检测,检出率近70%,表明围产期孕妇感染GBS是导致新生儿患肺部疾病死亡的重大威胁[4]。围产期孕妇对GBS的筛查方法灵敏度高,可以很大程度上帮助临床医师确诊GBS的感染,并积极采取抗感染治疗,有效降低孕妇与新生儿的治病率。基于之前文献报道,本次研究通过对比PCR检测法和显色平板法,比较二者敏感度及阳性率。PCR法全称聚合酶链反应,原理即通过扩增GBS特异性基因——CAMP[4]。本次研究中的孕妇样本从医生采样到送检验科的过程中可能要经过等待期1~2 d的时间,在等待时间里,标本中的细菌可能会发生降解或者死亡,因此在最终用的检查结果中,GBS的检出率可能会出现偏差。
  关于GBS感染和耐药性的相关研究表明,围产期孕妇预防GBS感染的理想抗生素是青霉素、氨苄青霉素,若对以上药物过敏的孕妇可以使用克林霉素或红霉素,但近年来GBS对以上药物的耐药性逐年增加,固有或诱导耐药以及GBS的ermB基因介导是主要的耐药机制,因而临床对与GBS耐药应加大监测,改善治疗方案。
  GBS已是医学界公认的导致羊膜腔感染及胎膜早破的致病菌[5],孕妇出现这些并发症之后,极易引发子宫腔感染,促进子宫收缩,继而导致晚期流产或早产等问题。因此要重视对孕妇的GBS筛查,运用PCR检测或显色平板均可筛查,但值得注意的是,临床运用显色平板筛查的灵敏度要显著高于PCR检测[6,7]。
  综上所述,在临床工作中应该对围产期孕妇加强GBS筛查的教育,增加此类人群的筛查力度,如利用显色平板法,由于较PCR法对GBS的筛查灵敏度明显升高。
  参考文献:
  [1]冯莹,许成芳,饶燕珍,等.妊娠晚期孕妇B族链球菌感染筛查与妊娠结局的临床研究[J].中华医院感染学杂志,2019,29(3):440-442,447.
  [2]黄满辉,张龙绘,李珍宇,等.B族链球菌核酸检测在产前筛查中的应用[J].中国医药科学,2015,5(24):81-84.
  [3]Saito M,Yamamoto S,Ozaki K,et al.A soluble form of Siglec-9 provides a resistance against Group B Streptococcus (GBS) infection in transgenic mice[J].Microbial Pathogenesis,2016,99(8):106-110.
  [4]马勇,李莉.荧光PCR法检测妊娠孕晚期妇女B族链球菌感染的应用价值[J].中国实用医药,2016,11(10):92-93.
  [5]Dzanibe S,Adrian PV,Kimaro Mlacha SZ,et al.Reduced trans-placental transfer of group B Streptococcus surface protein antibodies in HIV-infected mother-newborn dyads[J].Journal of Infectious Diseases,2017,215(3):415-419.
  [6]Helmig RB,Gertsen JB.Diagnostic accuracy of polymerase chain reaction for intrapartum detection of group B Streptococcus colonization[J].Acta Obstetricia Et Gynecologica Scandinavica,2017,96(9):1070-1074.
  [7]廖宗琳,陈丽霞,沈宏志,等.围产期孕妇生殖道B族链球菌感染的影响因素分析及对妊娠结局的影响[J].中华医院感染学杂志,2018,28(2):247-249,253.
  收稿日期:2018-12-29;修回日期:2019-2-13
  编辑/杨倩
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