急性特发性血小板减少性紫癜患儿细胞免疫功能变化及临床意义

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　　【摘要】 目的：探讨急性特发性血小板减少性紫癜（ITP）患儿细胞免疫功能变化及其临床意义。方法：采用流式细胞仪和BLISA法分别检测了31例生长发育正常的急性ITP 患儿外周血T淋巴细胞亚群和血清IL-4、IFN-r、TNF-a，并与30例同龄健康儿童组比较。结果：急性ITP 患儿血清IFN-r、CD3、CD4、CD4/CD8比值明显低于对照组（p<0.01），IL-4、TNF-a 、CD8明显高于对照组（p<0.01）。结论：急性ITP 患儿存在细胞免疫功能紊乱，在急性ITP 患儿的发病中起着重要作用。
　　 【关键词】 儿童；急性；特发性血小板减少性紫癜；细胞免疫功能
　　
　　 【Abstract】 Objective：To study on the changes of cellular immune function in patients with acute idiopathic thrombocytopenia purpura（aITP）and its clinical significance.Methods: ELISA method and the flowing cell instrument were usted to determined the serum levels of IL-4，IFN-r，TNF-a and T lymphocyte subtype in 31 cases of aITP and 30 case of healthy children .Results：the serum levels of IFN-r ，CD3,CD4 ，as well as the ratio of CD4/CD8 were significantly reduced in comprison with normal controls (NC)，IL-4,TNF-a ，CD8 were greatly increased in comprison with NC（p<0.01）. Cnclusion：The abnormal function of cellular immunity was the crux of the invasion of aITP.
　　 【Key words】 children ； acute；idiopathic thrombocytopenia；cellular immunity
　　 急性特发性血小板减少性紫癜（ idiopathic thrombocytopenia purpura ITP）是一种常见的自身免疫性出血性疾病，也是临床上常见的小儿良性血液病，但有时病情凶险，可因消化道大出血和脑出血等并发症死亡。研究表明，它的发生不但与B细胞功能有关，也与T淋巴细胞、自然杀伤细胞的表达及功能改变密切相关[1]。为了更好地了解急性ITP的细胞免疫功变化，我们对31例生长发育正常，近期（2周内）未患它疾病的急性ITP患儿进行了T淋巴细胞亚群及细胞因子测定，以探讨急性ITP患儿细胞免疫功能变化及其临床意义。
　　1 资料和方法
　　1.1 研究对象：急性ITP患儿31例（观察组）均为资料完整的我院2002年5月―2008年12月收治的住院患儿，诊断符合急性ITP的诊断标准[2]。患儿年龄3岁―13岁，平均年龄为6.1岁，男14例，女17例，所有患儿生长发育正常，近期（2周内）未患其它疾病。对照组为我院同期门诊体检的30例正常儿童，年龄、性别与观察组无统计学差异（p>0.05）。
　　1.2 方法：患儿入院后第二天晨起采空腹股静脉血,采用型号为COULTEE- EPLIS-XL型流式细胞仪检测患儿外周血T淋巴细胞CD3、CD4、CD8（以%表示），试剂由法国IMMUNOTECH公司提供。采用ELISA法测定IL-4、IFN-r、TNF-а（以pg/ml表示），试剂盒由美国PBM公司提供。
　　1.3 统计学分析：用SPSS14.0软件包对试验结果中的资料进行分析，以均数±标准差（-x±S）表示，组间差异采用t检验。
　　2 结果
　　2.1 急性ITP患儿外周血T淋巴细胞群变化：结果显示：急性ITP患儿CD3、CD4及CD4/CD8比值明显低于对照组（p<0.01），CD8明显高于对照组（p<0.01）(表1)。
　　表1 急性ITP患儿外周血T淋巴细胞亚群变化（-x±s）(%)
　　2.2 急性ITP患儿血清细胞因子水平变化：结果显示：急性ITP患儿IL-4，TNF-а明显高于对照组（p<0.01）、IFN-r明显低于对照组（p<0.01）(表2)。
　　表2 急性ITP患儿血清细胞因子水平变化（ˉx±s）(pg/ml)
　　3 讨论
　　 T淋巴细胞按其细胞膜表面抗原标志和功能分为CD4和CD8 淋巴细胞，CD4细胞是辅助性T细胞（Th）和诱导性T细胞（Ti）的表面标志，CD8 细胞是抑制性T细胞（Ts）和细胞毒T细胞（Tc）的表面标志，Th通过释放多种细胞因子辅助B细胞和Ti细胞的激活，增强机体的免疫功能，Ts 细胞通过释放抑制性细胞因子抑制B细胞和Ti细胞的活化，降低机体的免疫功能，所以，机体免疫功能的高低并不取决于淋巴细胞的多少，而是决定于CD4/ CD8的比值。ITP是一种自身免疫疾病，它的发病机制不但与体液免疫有关，而且还与细胞免疫极大相关[3]，有文献报道：虽然ITP患者CD4细胞水平低下，但其中Th功能却增加，CD8细胞水平升高，Tc 增加，而Ts功能却降低[4]，从而导致B淋巴细胞活化产生大量抗体（包括血小板抗体），引起血小板生存时间缩短和破坏增加，同时抑制骨髓巨核细胞，使其成熟障碍，引起血小板减少。本文研究表明，急性ITP患儿CD3、CD4及CD4 / CD8比值明显低于对照组（p<0.01），CD8明显高于对照组（p<0.01）。提示急性ITP患儿CD4 淋巴细胞的减少和CD8淋巴细胞的增加，主要是Ti细胞的减少和Tc细胞的增加，Th功能增强和Ts功能降低，对自身反应性T细胞的抑制作用明显降低和B淋巴细胞活化，导致急性ITP患儿自身免疫耐受破坏和疾病的发生。
　　 正常机体的CD4 T淋巴细胞根据其分泌细胞因子的不同，可分为Th1细胞和Th2细胞，它们发挥着不同的功能， Th细胞之间的失衡与自身免疫病、过敏性疾病、肿瘤、移植排斥反应及感染性疾病的发生与发展有密切关系[5] 。细胞因子TNF-а、IFN-r主要由Th1细胞分泌，IL-4主要由Th2细胞分泌，它们在免疫调控和免疫反应功能上起着重要的作用，它们不仅促进B细胞增生，调节B细胞产生抗体，同时还参与调节T细胞的活化[6]。我们对31例急性ITP患儿检查发现：IL-4和TNF-а明显高于对照组（p<0.01）,IFN- r明显低于对照组(p<0.01）,说明急性ITP患儿机体存在Th1/Th2细胞免疫功能紊乱，使B细胞活化增生，体液免疫功能增强，产生相关抗体（包括血小板抗体）[7]，血小板消耗增加及巨细胞增殖分化，导致患儿疾病的发生。
　　 综上所述，细胞免疫功能异常，是小儿急性ITP的发病的关键，在临床上使用一些免疫调节剂，纠正急性ITP患儿免疫功能失衡，增强其免疫耐受，对缩短其病情，加速急性ITP患儿的康复，降低其并发症和死亡率具有重要的临床意义。
　　参考文献
　　[1] 陈红英 ,孙鸣燕 ,刘靳波.特发性血小板减少性紫癜患儿血小板参数变化的初探讨.临床医学，2004
　　[2] 张楠,沈娣.血液病诊断及疗效标准(M).第三版,北京科学出版社,2008.
　　[3] 凌 云, 曹祥山 ,余力强,等. CD+4 CD+25调节性T细胞在特发性血小板减少性紫癜患者中的变化.中华血液学杂志, 2007

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