乙肝病毒标记物阳性表型血清标本乙型肝炎病毒HBV-DNA临床检验分析

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　　摘要：目的  探讨乙肝病毒标记物阳性表型血清标本在乙型肝炎病毒诊断中的应用。方法  选取2018年5月～2019年5月我院收治的乙肝病毒阳性患者100例作为实验组，另选取同期我院健康体检者100例作为对照组，采用酶联免疫吸附法与PCR荧光定量法对两组乙肝病毒标记物表型血清指标进行检测，比较兩组阳性反应组合反应阳性率、HBV-DNA水平。结果  通过酶联免疫吸附法检验，在Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG等指标中可表现出11种阳性反应组合，其中HBeAb、HBsAg、HBcAb-IgG阳性反应组合阳性率最高，其次为Presl、HBeAg、HBsAg、HBcAb-IgG阳性反应组合;实验组HBV-DNA水平为（4.70±1.30）×104，对照组HBV-DNA水平为（0.80±0.10）×104，实验组高于对照组，差异有统计学意义（P<0.05）。结论  乙肝病毒标记物表型血清标本检测在乙型肝炎病毒中诊断的价值较高，可为临床诊断提供科学依据。
　　关键词：乙型肝炎病毒;乙肝病毒标记物表型;血清标本
　　中图分类号：R737.33                               文献标识码：A                                  DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.04.061
　　文章编号：1006-1959（2020）04-0179-02
　　Abstract：Objective  To investigate the application of hepatitis B virus marker positive phenotype serum samples in the diagnosis of hepatitis B virus.Methods  100 patients with HBV-positive patients admitted to our hospital from May 2018 to May 2019 were selected as the experimental group，and another 100 healthy subjects from our hospital during the same period were selected as the control group.ELISA and PCR fluorescence quantitative methods were used the serum index of HBV marker phenotype was detected in the two groups，and the positive rate of combined positive reactions and HBV-DNA levels were compared between the two groups.Results  By enzyme-linked immunosorbent assay，11 positive reaction combinations can be shown in Presl， HBsAb， HBsAg， HBeAg， HBeAb， HBcAb-IgM， HBcAb-IgG and other indicators， among which HBeAb， HBsAg， HBcAb-IgG positive combination positive highest，followed by Presl， HBeAg， HBsAg，and HBcAb-IgG positive reaction combinations;HBV-DNA level in the experimental group was（4.70±1.30）×104，and HBV-DNA level in the control group was（0.80±0.10）×104，the experimental group was higher than the control group，the difference was statistically significant（P<0.05）.Conclusion  The detection of HBV marker phenotype serum samples is of higher diagnostic value in HBV，and it can provide scientific basis for clinical diagnosis.
　　Key words：Hepatitis B virus;HBV marker phenotype;Serum specimen
　　乙型病毒性肝炎（viral hepatitis type B）属于一种临床常见的肝脏炎性病变，严重威胁人们的健康，该病在全世界范围内都有着较高的发病率，并且该病辐射年龄较广，患者在发病后如果没有采取及时有效治疗措施，可能会导致疾病进一步恶化，进而导致肝癌与肝硬化发生。在临床诊断中一般予以肝功能检查，并且将血清病原学指标作为诊断依据，但依靠阳性表型指标无法准确反映患者体内乙肝病毒存在情况，同时也无法对疾病进展进行有效监测，临床误诊、漏诊率较高。患者常在出现确切症状后才会参与病理诊断，延误最佳治疗时机，预后较差，本研究主要探讨乙肝病毒标记物阳性表型血清标本乙型肝炎病毒HBV-DNA临床检验，现报道如下。 　　1资料与方法
　　1.1一般资料  选取2018年5月～2019年5月万年县人民医院收治的乙肝病毒阳性患者100例作为实验组，另选取同期我院健康体检者100例作为对照组。实验组男性52例，女性48例;年龄22～60岁，平均年龄（38.10±2.10）岁，对照组男性49例，女性51例;年龄21～61岁，平均年龄（39.10±2.20）岁。患者及家属知情同意并签署知情同意书，两组性别、年龄比较，差异无统计学意义（P<0.05），有可比性。
　　1.2方法
　　1.2.1酶联免疫吸附试验检测  采用KHBST-360酶标仪进行检测，对Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG等指标进行检测，所有试剂均根据试剂盒进行操作，对血清各项指标进行检测。
　　1.2.2 PCR荧光定量法检测  将血清标本放在PCR仪上进行测量，取患者血清标本，剂量为100 μl，对标本进行离心，离心时间设定为10 min，转速设定为13000 r/min，将上清液进行去除，将25 μl的DNA进行溶合，再次离心10 s，转速设定为2000 r/min，在沸水中维持10 min后再次进行离心，速率为13000 r/min，取上清液待检测。给予扩增试剂，利用Taq酶、UNG进行充分混合，采用离心处理，时间为10 s，转速设定为2000 r/min。对样本进行加样处理，在上述操作步骤中准备好标本，剂量为2 μl，转速设定为2000 r/min，并将其放入PCR荧光仪中，扩增检测，设置好相关参数进行检测，循环参数为3 min，温度为37℃，预变形参数为1 min，温度为92℃，变性参数为5 s，温度为92℃，应用荧光检测参数为30 s，温度为60℃，采用冷却仪器，循环次数为40次，温度为40℃。
　　1.3观察指标  ①阳性反应组合（Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG）阳性率、②HBV-DNA水平。
　　1.4统计学处理  采用SPSS 22.0统计学软件进行数据分析。计量资料用（x±s）表示，行t检验;计数资料采用n（%）表示，行？字2检验，P<0.05为差异有统计学意义。
　　2结果
　　2.1阳性反应组合阳性比例及HBV-DNA水平  在Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG等指标中可表现出11种阳性反应组合，其中HBeAb、HBsAg、HBcAb-IgG阳性反应组合阳性率最高，其次为Presl、HBeAg、HBsAg、HBcAb-IgG;Presl、HBeAg、HBsAg阳性反应组合HBV-DNA水平最高，其次是HBeAb、HBsAg、HBcAb-IgG阳性反应组合，见表1。
　　2.2两组HBV-DNA水平比较  实验组HBV-DNA水平为（4.70±1.30）×104，高于对照组的（0.80±0.10）×104，差异具有统计学意义（t=29.917，P=0.000）。
　　3讨论
　　乙型肝炎发病率较高，其发病情况受到了临床医生广泛关注[1]。目前临床常采用酶联免疫吸附法检测乙肝五项指标[2]，但是这种检测方式存在一定局限性，并且病毒复制水平较低，误诊率较高[3]。在具体的检测过程当中联合检测HBV-DNA水平，有助于对乙肝病毒情况进行更加精确的鉴别。同时在其检测基础上利用PCR荧光检测技术检测，可以对乙肝病毒标记物表型HBV-DNA水平进行检测，HBV-DNA在11种阳性组合当中都存在一定的阳性占比率，而对于乙型肝炎患者而言，其高复制性对患者威胁较大。
　　有研究表明[4]，患者病毒复制水平也能对乙型病毒肝炎的诊断提供依据，处于活动期的HBV-DNA水平高于非活動期。而在乙型肝炎病毒临床诊断过程当中，仅仅对患者体内乙型肝炎病毒复制的情况进行排除并不能完全提高检测效果，而利用乙型肝炎病毒复制检测的阴性情况能够进行弥补。在乙型肝炎的检测过程当中，对患者病情发展进行动态观察，可为临床治疗提供重要依据。
　　本研究结果显示，在Presl、HBsAb、HBsAg、HBeAg、HBeAb、HBcAb-IgM、HBcAb-IgG等指标中可表现出11种阳性反应组合，其中HBeAb、HBsAg、HBcAb-IgG阳性反应组合阳性率最高。实验组HBV-DNA水平为（4.70±1.30）×104，对照组HBV-DNA水平为（0.80±0.10）×104，实验组高于对照组，差异具有统计学意义（P<0.05），表明HBV-DNA水平的检测在乙型肝炎病毒诊断中有一定价值。
　　综上所述，在乙型肝炎病毒诊断中乙肝病毒标记物表型血清标本的诊断价值较高，可为临床诊断提供科学的依据。
　　参考文献：
　　[1]马梅香.乙肝病毒标记物阳性表型血清标本乙型肝炎病毒（HBV）-DNA临床检验分析的应用效果评价[J].心理月刊，2018，（12）：99.
　　[2]王晓玲，苑玉聪，郝金翠，等.乙肝肾合剂辨证加减联合常规西药综合治疗乙型肝炎病毒相关性肾炎的临床观察[J].辽宁中医杂志，2017，44（10）：2114-2117.
　　[3]徐茜茜，卓莉，杨悦，等.乙型肝炎病毒相关性肾炎不同年龄组患者的临床病理特点[J].中国病毒病杂志，2016，6（3）：206-211.
　　[4]李根瑞，陈涓涓，谢正媛，等.云南省7934例农村育龄人群乙型肝炎病毒标记物血清学筛查检测结果分析[J].中国预防医学杂志，2017，18（1）：31-34.
　　收稿日期：2019-11-07;修回日期：2019-11-20
　　编辑/李国苗
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