反复上呼吸道感染患儿血清25羟维生素D3与LL-37及Ig水平的相关性
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摘要：目的 探究反复上呼吸道感染患儿血清25羟维生素D3与LL-37及Ig水平的相关性。方法 选择2015年1月～2018年12月来我院就诊的反复上呼吸道感染患儿68例设为复发组，初次就诊的上呼吸道感染患儿60例设为初发组，另选取同期来我院体检的健康儿童56例设为对照组。采用化学发光法检测外周血血清中25羟维生素D3，用速率散射比浊法测定IgA、IgM、IgG水平，酶联免疫吸附测定（ELISA）检测痰上清液抗菌肽LL-37水平，并进行相关性分析。结果 初发组和复发组外周血25羟维生素D3、IgA、IgM、IgG的水平均低于对照组（P<0.05），复发组外周血25羟维生素D3、IgA、IgM、IgG的水平低于初发组（P<0.05），复发组LL-37的水平低于初发组（P<0.05），反复上呼吸道感染患儿外周血25羟维生素D3与痰上清液LL-37、外周血IgA、IgM、IgG水平呈正相关（r=0.594、0.682、0.543、0.621，P<0.05）。结论 血清25羟维生素D3与LL-37及免疫球蛋白与儿童反复上呼吸道感染具有一定的相关性，可能三者共同促进反复呼吸道感染的发生。
关键词：反复上呼吸道感染;血清25羟维生素D3;LL-37;免疫球蛋白
中图分类号：R725.6 文献标识码：A DOI：10.3969/j.issn.1006-1959.2020.09.054
文章編号：1006-1959（2020）09-0162-03
Correlation of Serum Vitamin D3 with LL-37 and Ig Levels in Children
with Repeated Upper Respiratory Tract Infections
DUAN Xun-xin，SHI Yu-ying，HUANG Long，LIANG Xiao-jun，HU Zhi-jian
（Department of Laboratory Medicine，the Affiliated Hospital of Jiujiang University，Jiujiang 332000，Jiangxi，China）
Abstract：Objective To explore the correlation between serum 25-hydroxyvitamin D3， LL-37 and Ig levels in children with repeated upper respiratory tract infections.Methods 68 patients with recurrent upper respiratory tract infection who came to our hospital from January 2015 to December 2018 were selected as the relapse group， and 60 patients with upper respiratory tract infection who initially visited the hospital were set as the initial group. Fifty-six healthy children with physical examination were set as the control group. Chemiluminescence method was used to detect 25-hydroxyvitamin D3 in peripheral blood serum. IgA， IgM and IgG levels were determined by rate-scattering turbidimetry， and the level of antibacterial peptide LL-37 in sputum supernatant was detected by enzyme-linked immunosorbent assay （ELISA），and conduct correlation analysis.Results The levels of peripheral blood 25-hydroxyvitamin D3， IgA， IgM， and IgG in the initial group and relapse group were lower than those in the control group （P<0.05）， and the levels of peripheral blood 25-hydroxyvitamin D3， IgA， IgM， and IgG in the recurrent group were lower than the initial group（P<0.05）;The level of LL-37 in the relapse group was lower than that in the initial group （P<0.05）. Peripheral blood 25-hydroxyvitamin D3 in children with repeated upper respiratory tract infection was positively correlated with sputum supernatant LL-37， peripheral blood IgA， IgM， IgG levels（r=0.594、0.682、0.543、0.621，P<0.05）.Conclusion Serum vitamin D3， LL-37 and immunoglobulin have a certain correlation with children's repeated upper respiratory tract infections， and the three may jointly promote the occurrence of repeated respiratory tract infections. Key words：Repeated upper respiratory tract infections;Serum vitamin D3;LL-37;Immunoglobulin
反复上呼吸道感染（repeated upper respiratory tract infections，RURTI）是儿科的常见呼吸系统疾病之一，发病率高达20%以上[1]，病程漫长，迁延不愈，可严重影响患儿的生长发育和身心健康，生存质量显著降低[2]。而免疫功能缺损被认为是引起上呼吸道感染反复发作的主要原因之一[3]。有研究表明[4]，维生素D对人体免疫起重要作用，抗菌肽LL-37是固有免疫的重要效应分子之一[5]，25羟维生素D3可通过其受体调节固有免疫，并促进抗菌肽LL-37的表达，增强机体的抗感染能力[6]。为了进一步探讨反复呼吸道感染患儿与25羟维生素D3、LL-3及免疫球蛋白的关系，本研究分析反复上呼吸道感染患儿血中25羟维生素D3、LL-37和免疫球蛋白水平变化，并分析25羟维生素D3与LL-37、免疫球蛋白水平之间的相关性，现报道如下。
1资料与方法
1.1一般资料 选择2015年1月～2018年12月九江学院附属医院儿科收治的RURTI患儿68例设为复发组，诊断均符合2008年中国医学会儿科学分会制订的标准，其中男38例，女30例，平均年龄（3.92±1.03）岁;选取初次就诊的上呼吸道感染患儿60例为初发组，其中男36例，女24例，平均年龄（3.37±1.32）岁;另外选取同一时间段健康体检的儿童56例设为对照组，其中男34例，女22例，平均年龄（3.67±1.14）岁。研究对象均排除使用肾上腺皮质激素、免疫调节剂及维生素D制剂等药物，有心血管疾病、严重肝肾功能不全、免疫功能缺陷等疾病，且在3 d内未进行任何干预治疗。本研究经过本院医学伦理委员会批准，患儿家长同意，并签署知情同意书。三组年龄、性别比较，差异无统计学意义（P>0.05），具有可比性。
1.2方法
1.2.1血清25羟维生素D3和免疫球蛋白水平测定 所有受试者均于清晨坐位采肘静脉血5 ml，室温下放置20～40 min后，3000 r/min 离心10 min，离心分离血清并转至EP管中，-70℃保存备检。采用德国罗氏Cobase601电化学发光仪及配套试剂盒检测血清25羟维生素D3，采用美国贝克曼IMMAGE800及配套试剂盒测定IgA、IgM、IgG水平。
1.2.2抗菌肽LL-37水平测定 初发组和复发组上呼吸道感染患儿用4%氯化钠溶液雾化吸入 10 min，痰液收集于无菌容器中，加入4倍体积的0.1%二硫苏糖醇（DTT），置于37℃水浴箱5 min，吹打致黏液完全溶解，3000 r/min 离心5 min，上清液置于-70℃保存。采用ELISA检测人抗菌肽LL-37水平，人抗菌肽ELISA试剂盒购于上海佳和生物科技有限公司。
1.3判断标准[7] 维生素D缺乏：<50.0 nmol/L;维生素D不足：50.0～75.0 nmol/L;维生素D充足：75.0～250.0 nmol/L[7]。
1.4统计学方法 采用SPSS 18.0统计软件进行分析，计量资料用（x±s）表示，两组间比较采用两独立样本t检验，计数资料使用[n（%）]表示，比较采用？字2检验，相关分析应用Pearson相关系数法，P<0.05表示差异有统计学意义。
2结果
2.1三组25羟维生素D3、免疫球蛋白及LL-37水平比较 复发组外周血25羟维生素D3、IgA、IgM、IgG的水平均低于对照组，复发组LL-37水平低于初发组，差异有统计学意义（P<0.05），见表1。
2.2三组维生素D水平分布情况 对照组存在一定比例的维生素不足及缺乏，但初发组和复发组维生素D缺乏率高于对照组，复发组全部为维生素D的缺乏，见表2。
2.3反复上呼吸道感染患儿25羟维生素D3与免疫球蛋白及LL-37的相关性 经Pearson分析反复呼吸道感染患儿外周血25羟维生素D3与免疫球蛋白IgA、IgM、IgG及LL-37的水平均呈正相关（r=0.682、0.543、0.621、0.594，P<0.05）。
3讨论
反复上呼吸道感染是小儿常见病，冬春季发病为主，导致儿童上呼吸道感染反复发作的原因是多方面的，常见原因有支气管哮喘、营养不良、免疫异常、病毒感染及慢性疾病等[8]，其主要病因与儿童自身的机体生理及免疫功能发育水平密切相关[3]。从儿童的生理结构特点来看，儿童上呼吸道气道狭窄，含气量少，肺弹力纤维不足，机体呼吸系统尚处于发育状态，功能薄弱[9]，且儿童黏膜淋巴血管较为丰富，组织娇嫩、柔软，对外界刺激较为敏感，缺乏抵抗力[10]。血清25羟维生素D3是维生素D在体内的主要存在形式，其是一种免疫调节激素，研究证实，其具有增强机体抵抗力的作用，当血清25羟维生素D3缺乏时，可为细菌人侵机体定值、增殖提供机会，增加呼吸道感染的风险，近年有学者报道呼吸道反复感染与维生素D缺乏有明显相关性[11]。此外，Belderbos ME等[12]研究也发现，新生儿25羟维生素D3缺乏明显增加上呼吸道感染次数和风险。
本研究中對照组具有一定比例的维生素D不足及缺乏，说明儿童应加强维生素D的补充，但初发组和复发组上呼吸道感染患儿的维生素D缺乏率高于对照组，复发组维生素D的缺乏率达100.00%。复发组和初发组上呼吸道感染患儿外周血清25羟维生素D3水平低于对照组，复发组上呼吸道感染患儿外周25羟维生素D3水平低于初发组，差异有统计学意义（P<0.05），表明血清25羟维生素D3缺乏可能与患儿反复呼吸道感染有关。 [9]王艳.小儿反复呼吸道感染防治[J].医学信息，2014，27（11）：337-337.
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收稿日期：2019-10-13;修回日期：2019-12-03
编辑/肖婷婷
作者简介：段训新（1992.9-），男，江西九江人，本科，主管技师，从事临床检验工作
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